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C肽放免代測(cè)服務(wù)操作說(shuō)明,提供C肽放免實(shí)驗(yàn)檢測(cè)服務(wù)

更新時(shí)間:2019-06-13      瀏覽次數(shù):1589

C肽放免代測(cè)服務(wù)操作說(shuō)明,提供C肽放免實(shí)驗(yàn)檢測(cè)服務(wù)

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通用名:C-肽免疫放射分析藥盒

英文名:C–peptide Immunoradiometric Assay Kit 漢語(yǔ)拼音:C-tai Mianyifangshefenxi Yaohe

【用途】 用于科研血清樣本中 C-肽 (C-P)的定量測(cè)定

【研究意義】

1、 指導(dǎo)胰島素治療,對(duì)于胰島素治療的樣本,C 肽測(cè)定可以確定是否繼續(xù)使用胰 島素治療,還是用口服降糖藥或飲食治療。C 肽的測(cè)定值對(duì)糖尿病的治療具有 重要意義。

2、 對(duì)低血糖綜合癥的診斷。

3、 對(duì)胰島移植和胰腺移植的樣本,C 肽測(cè)定可以了解移植是否存活和 B 細(xì)胞的功 能。

4、 同時(shí)測(cè)定 C 肽和胰島素可了解肝病的變化,如肝硬化時(shí),外周血 C 肽/胰島素 的比值下降。 5、 對(duì)胰島或胰腺腫瘤治療后復(fù)發(fā)和功能的診斷。

【試驗(yàn)原理、方法】 C-P 免放藥盒是一種固相“三明治”夾心式免疫放射量度分析,由兩株單克隆 抗體識(shí)別和分析。兩株單克隆抗體分別抗 C-P 分子相距很遠(yuǎn)的兩個(gè)位點(diǎn):株單 抗包被于試管底部?jī)?nèi)壁;第二株單抗用 125I 進(jìn)行放射性標(biāo)記,用作示蹤劑。存在于 標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品中的 C-P 分子被夾在兩株單抗之間。過(guò)量未結(jié)合的示蹤劑在洗滌 過(guò)程中容易地被除去,而抗體僅保留了被吸附的抗體-抗原-示蹤劑結(jié)合物。結(jié)合在 包被管上的放射活性的量與測(cè)定開(kāi)始時(shí)存在的 C-P 的量成比例。

由于 C-P 極不穩(wěn)定,溶解后需立即使用,其余溶液按每次使用量分裝后置-20℃可 儲(chǔ)存 3 個(gè)月,只能凍融一次,避免反復(fù)凍溶。

【適用儀器】 1、γ-計(jì)數(shù)器 2、振蕩器

【樣本要求】 110 微升科研血清樣本。 采靜脈血 5ml 于塑料試管中,靜置使其凝固后,1500 轉(zhuǎn)/分離心,取其上清液, 放置玻璃瓶中。如果樣本不立即使用,可在-25℃~-18℃儲(chǔ)存 6 個(gè)月。

【試驗(yàn)方法】

1、 將實(shí)驗(yàn)所需試劑及樣本放置室溫,平衡至少 30 分鐘以上才可進(jìn)行操作; 標(biāo)準(zhǔn)品用 1.0ml 去離子水溶解后輕輕搖勻,放置 10min 左右方可使用。

2、 打開(kāi)包被試管包,取出包被管進(jìn)行編號(hào),所有實(shí)驗(yàn)均做雙管重復(fù);

3、 取每個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控血清和樣本 100µl 加入相應(yīng)編號(hào)的試管中;

4、 每管均各加入 100µl 標(biāo)記抗體液,室溫(17-27℃)振蕩 1 小時(shí)后,吸干 或倒出;

5、 每管均各加入 2ml 洗滌液后,吸干或倒出,再重復(fù)操作一遍此步驟;

6、 用 γ-計(jì)數(shù)器測(cè)定每管 1 分鐘的放射性強(qiáng)度計(jì)數(shù);

7、 從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取樣本及質(zhì)控血清的濃度。

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