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酸性轉(zhuǎn)化酶

更新時(shí)間:2019-11-19      瀏覽次數(shù):2411

信帆生物專業(yè)提供酸性轉(zhuǎn)化酶,產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定,*,確保銷售給客戶的產(chǎn)品是能夠符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),適合客戶要求的產(chǎn)品。本產(chǎn)品*,歡迎新老客戶前來咨詢訂購.

測(cè)定意義:

蔗糖轉(zhuǎn)化酶(InvertaseIvr)催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖,是高等植物蔗糖代謝關(guān)鍵酶之一。根據(jù)適 pH,Ivr分為酸性轉(zhuǎn)化酶(AI)和中性轉(zhuǎn)化酶(NI)兩種類型。                          

AI(EC 3.2.1.26)主要存在于細(xì)胞液泡或自由空間中,適 pH 4.5~5.0(酸性),通過降解液泡中蔗糖,調(diào)節(jié)液泡中蔗糖的利用和果實(shí)內(nèi)糖類的積累。

測(cè)定原理:

AI催化蔗糖降解產(chǎn)生還原糖,進(jìn)一步與3,5-二硝基水楊酸反應(yīng),生成棕紅色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范圍內(nèi)510nm光吸收增加速率與AI活性成正比。

自備用品:

可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體50mL×1瓶,4保存;

試劑一:液體50mL×1瓶,4保存;

試劑二:粉劑×1瓶,4保存;臨用前加入25mL試劑一充分溶解備用;用不完的試劑4保存;

試劑三:液體30mL×1瓶,4保存;

粗酶液提?。?/span>

稱取約0.2g組織,加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿;12000g,4,離心20min,取上清,置冰上待測(cè)。

測(cè)定步驟和加樣表:

試劑名稱(μL

測(cè)定管

對(duì)照管

粗酶液

200

200

試劑一

 

800

試劑二

800

 

混勻, 37準(zhǔn)確水浴30min,煮沸10min左右(蓋緊,以防水分散失),流水冷卻后充分混勻(以保證濃度不變)

試劑三   

500

500

混勻,煮沸10min左右(蓋緊,以防止水分散失),流水冷卻后充分混勻, 510nm處記錄各管吸光值A,如果吸光值大于2,可以用蒸餾水稀釋后測(cè)定,ΔA=A測(cè)定-A對(duì)照

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